复旦大学附属肿瘤医院蔡国响教授与上海交通大学医学院附属仁济医院王争教授等报告的队列研究的结果表明，循环肿瘤DNA(ctDNA)甲基化的纵向评估可能有助于Ⅰ~Ⅲ期结直肠癌复发的早期发现及复发风险分层，优化结直肠癌患者的风险分层和术后治疗。(JAMA Oncol. 2023年4月20日在线版)

及早发现分子残留病变并进行危险分层，可提高肿瘤患者的治疗效果。因此，需要进行有效的实用型测试。结直肠癌复发率较高，ctDNA检测是研究热点，现有研究多聚焦于高通量测序技术(NGS)检测的ctDNA突变，流程复杂、周期长、成本较高，普适性不足。

该研究基于鹍远生物自主研发的CRC多基因甲基化检测技术ColonAiQ(常 艾 克)，前期研究中证实了ctDNA甲基化在Ⅰ~Ⅲ期结直肠癌复发风险分层、指导治疗决策及早期复发监测中的应用价值，为这一无创血液筛查和监测技术进入临床实践提供了依据，使其有望成为兼具灵敏度、时效性和经济性的，可惠及众多结直肠癌患者分子残留疾病的检测新指标。

这项多中心前瞻性纵向队列研究在2019年12月12日至2022年2月28日进行，从两家医院招募了350例Ⅰ~Ⅲ期结直肠癌患者，采集了术前(7天)、术后1个月及辅助治疗后随访各时间点(每隔3个月)的血液样本1228份，采用多重、ctDNA甲基化、定量聚合酶链反应法检测血液样本中的ctDNA。主要研究终点为无复发生存。

结果显示，ctDNA可预测结直肠癌患者复发风险，ctDNA阳性患者的复发风险显著高于阴性者(HR=17.5，95%CI 8.9~34.4，P<0.001)。ctDNA预测复发的灵敏度为78.0%，特异度90.2%，在不同分期的肠癌中均保持预测效能稳健。

ctDNA预测复发的性能优于癌胚抗原CEA，ctDNA和CEA联合检测可提高预测复发的效能(AUC=0.849)，优于ctDNA(AUC=0.839)和CEA(AUC=0.623)，且阳性患者复发风险更高(HR=19.0，P<0.001)。

ctDNA可实现复发风险分层，指导治疗决策，避免过度治疗。将Ⅲ期患者依据临床复发风险评估(高风险T4/N2和低风险T1-3

N1)和辅助治疗周期(3或6个月)划分为不同亚组。ctDNA阳性高风险人群中，接受6个月辅助治疗的患者复发风险更低;低风险人群中，辅助治疗周期与患者复发风险间无显著相关。ctDNA阴性患者无论临床复发风险与辅助治疗周期，预后均显著优于ctDNA阳性患者。未接受辅助治疗的Ⅰ期和低风险Ⅱ期CRC患者中，66.7%的ctDNA阳性患者2年内复发，而所有ctDNA阴性患者均未在2年内复发。

综合治疗(手术+ACT或单纯手术)结束及后续随访，ctDNA可较影像学最多提前约20个月提示肿瘤复发，综合治疗结束后，ctDNA阳性患者的RFS与阴性患者相比显著降低(HR=20.6，P<0.001)，在治疗后随访监测的任一时间点，ctDNA阳性皆与更差的预后有关(HR=13.5，P<0.001)，ctDNA检测持续阳性的患者RFS显著低于检测持续阴性的患者(HR=68.8，P<0.001)。

研究解读

这项创新性表观遗传学液体活检技术研究得到国际结直肠癌分子诊断标志物和表观遗传学研究领域权威专家Ajay Goel教授(美国希望之城医学中心)的高度评价。Ajay Goel教授表示，这项研究结果和其他独立队列研究明确了基于ctDNA预测的分子残留疾病可作为Ⅰ~Ⅲ期结直肠癌复发的最显著风险因素，独立于肿瘤分期和其他经典临床病理风险因素。将ctDNA分子残留疾病检测与癌胚抗原水平分析相结合，进一步提高患者复发的预测效果。该项液体活检检测是一种简单且具成本效益的手段，更有利于在临床实践中进行检测及分层管理。

选择DNA甲基化作为新型MRD标志物，相比于突变检测，优势在于不需要做肿瘤组织的全基因组测序筛选，直接用于血液检测，而且避免因检出源自正常组织、良性疾病和克隆性造血的体细胞突变而导致假阳性结果。

该研究是国际上首个应用基于PCR的血液ctDNA多基因甲基化技术于结直肠癌复发预测和复发监测的多中心研究，提供了一个与现有MRD检测技术方法相比性价比更高的技术路径和解决方案，有望大大提高结直肠癌复发预测和监测的临床使用普及率，并显著改善病人的生存期和生存质量。

(编译 朱敏)