1. 流式细胞仪平台仪器如下：

●BD FACSAria Ⅱ (Special Order System)分选型流式细胞仪，配备有633nm laser, 488nm laser 和 355nm UV laser

●BD Accuri C6 分析型流式细胞仪，配备有488nm laser 和 633nm laser.

2. 流式细胞仪平台软件如下：

 ●FlowJo 7.6.5 ● ModiFit 4.0

●BD FACSDiva 6.1.3 ● CFlow plus

3. 为保证大型高精度实验仪器的顺利运行，本平台实行专人负责操作、维护及管理。仪器负责人需通过该平台仪器的专业培训并获相关资质方可上机操作。

4. 本平台实行仪器使用登记制度，纪录仪器使用日期、仪器状态、使用参数、检测样本量、使用人及仪器负责人。

5. 仪器原则上每周一至周五全天开放。

6. 仪器负责人应维持流式细胞仪及周围环境的洁净，实验后需清洗机器管道、每周需清洗流动室、定期需更换仪器滤器、滤膜等，定期清空废液桶，长期检测机器控制、监督公司定期维护等。

7. 申请使用流式细胞仪平台请提前1周到中心实验室领取申请表填写，主任签字后交回。申请过程：经院学委会同意后—索取申请单—填写申请表—课题负责人签字—中心实验室负责人审核。样品检测需提前预约。申请人需认真查看“送样须知”后填写“使用申请单”，注明申请单位及科室以及课题名称等，并附样品来源、荧光素名称、细胞数量及实验相关信息。(“使用须知”及“使用申请单”可在预约时找平台负责人领取)

8.数据管理

实验结果以刻录光盘形式发送，本平台只保存实验结果六个月;第三方软件的分析结果可以通过E-mail形式发送。

9. 实验中每次实验的实验者请不要超过2人，无关人员请不要私自进入实验室;实验结束后有义务通知下一个预约者，以尽量减少仪器开机空置时间。

10.实验结束后，认真填写实验登记并签字。

联系人：刘锡娟 丁慧荣

联系电话：88196715

地址：科研楼612 室

附：

流式细胞仪平台使用须知

1. BD FACSAria Ⅱ (Special Order System)分选型流式细胞仪

BD FACSAria Ⅱ (Special Order System)分选型流式细胞仪是是BD公司生产的3激光9色多色流式系统兼具分析和分选双向功能的台式机，适用于临床和基础的科研需要。BD FACSAria Ⅱ具有高灵敏度、高分辨率、高分选精度和高速度分选的特点，同时因为特殊定制，配备有355nm激光，所以可以完成SP及其它紫外激光激发的荧光素标记的细胞的分析和分选。

主要用途：

●SP细胞分析及分选

●肿瘤干细胞分析及分选

●96孔板单个细胞分选

●GFP标记细胞分选

●紫外激光激发的荧光素标记的分析及分选

●多至9色的多色分析和分选

2. BD Accuri C6 分析型流式细胞仪

BD Accuri C6 分析型流式细胞仪配备有一根蓝激光器 (488nm) 和一根红激光器 (640nm)，具有以下特点：①其数据数字采集具有跨越7个数量级的动态范围 (1600万道的数值化数据解析度)，保证所有数据总是有效可用的，不会在收集过程中发生丢失数据。②它的操作软件是开放式的，可以装到每一位使用人的电脑上，在事后对收好的数据进行进一步优化，以得到更为精确的分析结果。③可以使用多种类型的样品管，包括任何品牌的12×75mm管和普通1.5ml和2.0ml EP管。

主要用途：

●细胞周期检测

●细胞增殖检测

●细胞凋亡检测

●线粒体膜电位检测(JC-1染色)

●肿瘤干细胞分析

●纳米材料细胞吞噬的检测

●细胞钙流检测

●CBA(Cytometric Beads Array)实验

●ROS(reactive oxygen species)检测实验

●细胞膜、浆及核中蛋白因子及抗原的检测

FlowJo7.6.5软件

随着流式细胞技术在科研工作中的应用愈加广泛和常规化，科研工作者对流式细胞技术数据结果的分析需求和呈现方式越来越高，尤其是在文章发表或会议报告中愈发要求其客观、直观和美观。为满足这一需求，经过前期调研和分析，中心实验室流式细胞仪平台遴选出一款流式细胞术第三方分析软件FlowJo。FlowJo是TreeStar, San Carlos,CA公司开发的一款由生物科学家研发的兼容多种电脑操作系统的流式数据分析软件，是各高影响力科学期刊使用最多的分析软件，逐渐被视为流式研究分析领域的金标准。

主要用途

可以对FACSAria Ⅱ和Accuri C6流式细胞仪检测输出数据以及任何流式细胞仪输出的FCS 3.0数据进行二次分析，比如动力曲线呈现，峰图的叠加及立体呈现等等。

ModiFit软件

ModiFit 4.0是美国Verity Software House公司开发的专用于周期分析的流式第三方软件。

主要用途

可以提供周期中各倍体，如G1/G0、 S 和G2/M及Sub-G1峰百分比等信息;

送 样 须 知

1. 样品需是单细胞悬液。

2. 分选样品细胞量：≥1×107 个细胞;

分析样品细胞量：≥1×106个细胞

3. 细胞悬浮于1×PBS溶液中。

4. 上样前必须用400目尼龙网或其他相当大小的网过滤

5. 分选只能使用流式分选专用管;分析检测可以使用多种类型的样品管，包括任何品牌的12×75mm管和普通1.5ml和2.0ml EP管。

6. 需准备好流式检测对照管和补偿管。

7. 每周一至周五，请提前1-2周预约。取消预约者请至少提前1日向负责人说明，并将预约取消。

8. 第三方软件分析时间：定于8：00-11：30(周二和周三);数据需是FCS3.0格式。