虽然对于已发生远处转移的黑色素瘤患者，采用肿瘤浸润淋巴细胞(tumor-infiltrating lymphocytes，TIL)的过继免疫治疗是一种有效的肿瘤免疫治疗方法，但是由这些有效的TIL所识别的肿瘤抗原靶并不清楚。据一项新研究报道，一种名为串联小基因文库的新筛选方法使得肿瘤反应性T细胞的肿瘤抗原分析更为容易，并可能启发新的过继性T细胞疗法的发展。对于2例接受过继性T细胞治疗的转移性黑色素瘤患者，新方法证实独特的肿瘤突变抗原识别似乎是肿瘤完全消退的关键。Lu等在近期的《临床肿瘤研究》上发表了此项研究结果。

研究方法

研究人员从2例转移性黑色素瘤患者获得肿瘤样本，2例患者均对过继性T细胞免疫治疗有效。使用两种筛选方法来鉴定被临床上有效的T细胞治疗所识别的肿瘤抗原。首先，研究者用cDNA文库筛选法鉴定出非突变的靶抗原，然后使用串联小基因文库筛选法鉴定不能被常规筛选方法所发现的突变靶抗原。

对于小基因文库筛选法，研究者用下一代DNA测序法检测此2例患者肿瘤DNA的编码区，并鉴定出突变。接下来，研究者构建这些突变的文库。他们仅仅合成了突变部位周围的小区域，而非整个突变基因。然后，研究者筛选小基因文库以鉴定在患者肿瘤组织中被TIL所识别的靶抗原。

研究发现

通过使用cDNA文库的筛选方法，研究人员鉴定出3个新的非突变肿瘤靶抗原和4个之前已知的非突变肿瘤靶抗原。通过使用串联小基因文库的方法，研究人员鉴定出两个新的突变肿瘤靶点—POLA2 和KIF2C，它们在细胞增殖中发挥重要的作用。

研究者总结道：“该研究表明，应用小基因的方法鉴定肿瘤抗原能弥补传统cDNA文库筛选法评估肿瘤反应性T细胞抗原的不足。突变的基因产物，特别是在肿瘤发生中起重要作用的基因产物，可能是特别有效的免疫治疗的靶点。本研究证实，小基因的方法可使突变抗原的鉴定变得更容易，并为靶向肿瘤特异性突变抗原的免疫治疗提供可能。”

(编译 钱磊 许人 审校 吴荻)