肿瘤免疫疗法两大主力无疑为免疫检查点抑制剂和CAR-T，但两种免疫疗法都有不尽如人意之处，CAR-T在血液系统肿瘤治疗颇有建树，但实体瘤治疗方面还差强人意，而免疫检查点抑制剂可增强免疫系统功能，在治疗实体瘤上颇有成效，但会带来严重的免疫相关不良反应，二者能否联合呢?

美国纪念斯隆凯特琳癌症中心研究者成功地使得二代CAR-T细胞分泌PD-1抗体单链可变区片段(scFv)，同时提高自身和肿瘤环境中T细胞的抗癌活性，抗肿瘤治疗效果甚至比CAR-T联合PD-1抗体的治疗效果更好。这些scFv局限分泌在肿瘤附近，基本不进入血液循环，令CAR-T抗肿瘤活性更高更持久的同时，保证了较低的副作用。(Nat Biotechnol. 2018 年8月13日在线版. doi: 10.1038/nbt.4195)

结合CAR-T和免疫检查点抑制剂并不容易，细胞上添加额外蛋白直接加PD-1抗体比较困难，于是研究者选择了PD-1抗体可变区的片段，类似迷你PD-1抗体，也可很好地结合PD-1，避免肿瘤细胞逃脱T细胞的免疫监视。

研究者首先构建了小鼠用的这种装甲CAR-T，选择了CD19和MUC16两种肿瘤特异性抗原(前者常出现于血液系统肿瘤中，后者是卵巢癌和胰腺癌的分子标志)，结合小鼠CD28和CD3zeta，成功制成两种CAR-T细胞19m28mZ和4H11m28mZ，并加上了挑选出的scFv——RMP1-14。

研究者在小鼠卵巢癌模型中尝试了这两种装甲CAR-T，同时对比了普通CAR-T联合直接注射scFv的组合疗法，发现装甲CAR-T的治疗效果优于单独使用普通CAR-T，与CAR-T联合scFv效果类似。

在肿瘤接种120天时，小鼠体内仍可检测到装甲CAR-T细胞。受到免疫检查点抑制剂鼓舞效果增强的不只装甲CAR-T，肿瘤微环境中的普通T细胞也受到鼓舞，表达的CD80、CD107α、IFN-γ、颗粒酶B等与抗肿瘤活性相关的细胞因子水平都上升。

在小鼠中获得初步成功后，研究者筛选了人源的PD-1抗体片段，锁定表现最稳定的E27片段，成功构建了人源的装甲CAR-T。人源装甲CAR-T表现与小鼠装甲CAR-T一致，可很好地结合并有效抑制PD-1，在与肿瘤细胞共培养过程中，表现出比普通CAR-T更好的增殖能力。

在淋巴瘤和卵巢癌小鼠模型中，人源化装甲CAR-T均表现出比普通CAR-T更好的疗效，小鼠存活期大大延长，装甲CAR-T比普通CAR-T联合PD-1抗体表现出更好的疗效。

研究者检测了小鼠体内的PD-1抗体和scFv的去向，通过荧光成像看到PD-1抗体注射到小鼠体内后很快扩散至全身，而scFv因是CAR-T分泌，基本保持在肿瘤内，未在小鼠血液中检测到scFv，说明scFv较少或基本不进入血循环，意味着抑制免疫检查点带来的全身不良反应将大大减少。

该方法为CAR-T研究提供了新的思路，可建立分泌不同分子的CAR-T，根据患者需求量身打造。免疫检查点除了PD-1，还有CTLA-4、LAG-3、TIM-3等，这些都是未来可能被添加到CAR-T上的新装备。研究者正在设计临床试验，希望这些装甲CAR-T可以在肿瘤治疗中一展拳脚。

(编译 王微微)