《科学》及其子刊《科学·免疫学》、《科学·转化医学》杂志发表美国约翰斯·霍普金斯大学三篇最新研究成果，研究团队成功开发出一种针对突变相关新抗原(MANA)的新型双特异性抗体，在识别细胞表面突变基因留下的“踪迹”后，能招募T细胞成功清除癌细胞，在动物实验中体现了出色的疗效，成功突破了TP53、RAS难以靶向的瓶颈。(Science. 2021, 371: eabc8697. DOI: 10.1126/science.abc8697; Sci Immunol. 2021, 6: eabd5515; Sci Transl Med. 2021; 13: eabd3595)

研究者研发的这种双特异性抗体能识别携带RAS基因突变或者TP53基因突变的肿瘤细胞，并且激发T细胞消灭携带这些突变的肿瘤细胞。《科学》杂志为这两项研究专门发表新闻报道。

RAS和p53一直是不可成药靶点，在肿瘤患者中这两个基因突变又最常见，传统小分子药物很难有效靶向RAS或p53。单克隆抗体靶向p53和RAS很困难，因为它们在细胞表面很少表达，单抗类药物很难进入细胞发挥抑制作用。近年来，针对KRAS G12C突变体开发的小分子靶向疗法获得突破，但只适用于有限的一小部分患者。

虽然RAS和TP53是细胞内蛋白，但它们在细胞内被降解后生成的多肽片段能与人类白细胞抗原(HLA)蛋白构成复合体，然后被呈递到细胞表面，成为T细胞受体(TCR)可识别的新抗原。

这类多肽片段就是前面提到的MANA，它也为开发针对存在TP53或RAS突变细胞的抗体提供了目标，但正常情况下MANA在细胞外表达水平非常低，每个细胞上的拷贝数可能都不到10个。

要想靶向这么少的目标，就需要抗体在设计上全面升级，实现真正的精准打击。研究团队花费了5年多的时间，才搞出了这次的主角——一种名叫“Diabody”的新型双特异性抗体。

与传统上的“Y”字形抗体不同，这种双特异性抗体在设计上没有抗体的Fc段，而是把靶向突变蛋白的单链可变区片段(ScFv)和激活T细胞受体CD3的ScFv(UCHT1)连在一起组成单链Diabody(scDb)。

双特异性抗体是药物研发领域的热点之一，通常的单克隆抗体只能与一个抗原结合，而双特异性抗体能够与两个不同的抗原结合，从而扩展抗体的功能。其中一种重要类型被称为T细胞接合器(T cell engager)。

为了准确靶向pHLA，研究者利用噬菌体展示(Phase Display)技术，从亲和力更高的“仿TCR抗体”(TCR-mimic)片段库中挑选合适的ScFv，例如在开发针对TP53最常见突变TP53-R175H的scDb时，用的是一种名为H2的片段。H2能高度特异性地结合TP53-pHLA，然后激活T细胞免疫应答，且不会与正常细胞野生型TP53蛋白的pHLA结合。针对不同类型的RAS突变，ScFv就换成了亲和力高的R2、L2等。意即scDb可以根据治疗目的，进行灵活设计和组合。

研究者在多发性骨髓瘤模型(有TP53-R175H突变)小鼠身上，测试了H2-scDb的治疗效果。发现不管是使用小剂量还是大剂量，小鼠的肿瘤都显著缩小。但如果使用CRISPR敲除掉TP53基因，或者是不注射人体来源的T细胞，那H2-scDb就无效果。

《科学·免疫学》的研究论文显示，靶向RAS突变的scDb在抗原水平很低的状态下，也能准确识别和清除KRAS G12V或RAS Q61突变的肺癌和胰腺癌细胞。《科学·转化医学》的论文则让scDb针对T细胞癌症，试验效果也非常理想。

《科学》杂志发表的评论指出，这些研究首次提供证据表明，通过构建同时靶向CD3的双特异性抗体，能靶向此前“不可成药”的细胞内靶点，在细胞表面表达水平极低的情况下仍然能够激活T细胞反应并消灭癌细胞。

这种scDb因为缺少抗体的Fc段，它们在血液中的稳定性较差，清除速度较快，想维持治疗浓度就得给患者持续泵注。scDb使用的ScFv，也需要根据患者TP53或RAS突变的具体种类进行“定制”。不过能突破p53不可成药的瓶颈，已经很让人兴奋了。

这种双特异性抗体激活免疫应答的作用特点，较尚未成熟的KRAS小分子靶向药，或会在疗效上更有优势。未来这种双特异性抗体联合免疫检查点抑制剂、溶瘤病毒、肿瘤疫苗等新疗法有望在抗肿瘤免疫治疗中实现突破。 (编译 张娜)